Descrição
CAPTURA™, como o nome sugere, foi especialmente desenvolvido para efetuar a etapa de captura de proteínas, ou outras substâncias de interesse.
CAPTURA™ são micropartículas magnéticas de sílica porosa, o material é composto por um núcleo superparamagnético de nanopartículas de óxido de ferro totalmente recobertas por uma matriz de sílica. CAPTURA™ apresenta alta resposta magnética sendo rapidamente atraída por um ímã ou eletroímã. CAPTURA™, diferentemente de outros materiais magnéticos existentes no mercado, foi desenvolvido especialmente para uso em processos de purificação de substâncias de interesse e por isso apresenta alta estabilidade química e mecânica, além de alta área de superfície e estrutura mesoporosa, ideal para a purificação de proteínas.
CAPTURA™ Série P são materiais magnéticos que contém em sua superfície uma alta densidade de grupos com cargas positivas fortes e fracas e são indicados para a captura de moléculas carregadas negativamente (troca aniônica). CAPTURA™ Série P foi desenvolvido especialmente para a purificação de proteínas, mas também pode ser utilizado para captura e purificação de outros compostos químicos e/ou bioquímicos que possuam cargas negativas em sua estrutura. CAPTURA™ Série P pode ser utilizado tanto para a captura de proteínas que contém alta densidade de cargas negativas em sua superfície quanto de proteínas que contém apenas alguns aminoácidos carregados negativamente. CAPTURA™ Série P pode ser utilizado para a captura altamente seletiva de proteínas em meios de baixa ou moderada força iônica (5-25 mM) e também, em alguns casos, em meios de média ou elevada força iônica (25-100 mM). A utilização racional dos materiais CAPTURA™ Série P produzidos pela Kopp Technologies pode resultar em protocolos de purificação de proteínas, ou outras substâncias, altamente seletivos rendendo produtos com um bom grau de pureza. As características magnéticas do material fazem com que ele possa ser utilizado para captura de moléculas de interesse diretamente em meios de cultura, ou outros meios contendo alto grau de impurezas e sólidos em suspensão, sem a necessidade de etapas prévias de preparação ou clarificação, economizando tempo e dispensando o uso de equipamentos como filtros e centrífugas. O uso de CAPTURA™ Série P como primeira etapa de um processo de purificação de proteínas pode simplificar e facilitar processos de purificação que tem como exigência alto grau de pureza.
Características Técnicas
CAPTURA™ CNC3
CAPTURA™ CNC3 é um adsorvente magnético que contém em sua superfície uma alta densidade de aminas terciárias carregadas positivamente, unidas a superfície do material por uma cadeia de 6 carbonos. O grupo funcional CNC3 é moderadamente hidrofílico e apresenta grande flexibilidade e mobilidade, sendo ideal para a adsorção seletiva de proteínas com alta densidade de resíduos de aminoácidos carregados negativamente em sua superfície. CAPTURA™ CNC3 pode ser utilizado diretamente para a captura de proteínas a partir de meios de cultura ou extratos naturais não clarificados e que contém outros sólidos em suspensão. CAPTURA™ CNC3 é ideal para a captura de proteínas em meios de moderada ou baixa força iônica (5-50 mM). CAPTURA™ CNC3 pode adsorver com boa seletividade proteínas com carga altamente negativa, e dessorver de forma seletiva proteínas com diferentes densidades de cargas negativas mediante uso de gradiente salino.
*Para este experimento foi oferecido 25 mg de albumina de soro bovino/g de material. A adsorção foi realizada em tampão histidina 25 mM pH 6.0 por 30 minutos em temperatura ambiente.
**Para este experimento foi oferecido 25 mg de proteína de soja fração solúvel/g de material. A adsorção foi realizada em tampão histidina 25 mM pH 6.0 por 30 minutos em temperatura ambiente.
Como Usar
CAPTURA™ Série P foi desenvolvido para a purificação de proteínas em solução por troca aniônica (AEX), principalmente em estágios de purificação iniciais ou intermediários. Empregando CAPTURA™ Série P é possível isolar e concentrar qualquer proteína, desde que a proteína alvo esteja carregada negativamente, ou seja esteja em um valor de pH acima de seu ponto isoelétrico (PI), e se encontre em um ambiente químico com baixa ou moderada concentração de íons (baixa ou moderada força iônica). Desta forma, CAPTURA™ Série P pode ser empregado para a purificação de proteínas diretamente de meios de cultura ou extratos naturais não clarificados desde que o pH do meio se encontre acima do PI da proteína alvo e a força iônica do meio não seja maior do que 100 mM, em alguns casos, e para alguns materiais específicos, a adsorção só ocorre em meios com força iônica inferior a 25 mM. Caso o pH ou a força iônica não sejam adequados para a captura da molécula alvo, procedimentos de filtração ou diálise podem ser empregados para ajustar o pH ou a força iônica do meio. Proteínas com alta ou baixa densidade de grupos carregados negativamente podem ser purificadas utilizando CAPTURA™ Série P, desde que o protocolo e o adsorvente magnético escolhidos sejam adequados para a realização do procedimento. Recomendamos utilizar os materiais CAPTURA™ Série P na faixa de pH entre 3.0-8.5, o uso em valores de pH superiores a 8.5 pode ocasionar deterioração do material e diminuir sua vida útil.